SACT

Determinación plasmática de vitamina C
Comparación de la evaluación colorimétrica del pH vaginal con Nugent Score

La hipovitaminosis C en el hospital es muy prevalente pero casi no se reconoce. La conciencia médica de este trastorno potencialmente importante se ve obstaculizada por la incapacidad de la mayoría de los laboratorios de los hospitales para determinar las concentraciones plasmáticas de vitamina C. La disponibilidad de un método simple y fiable para analizar la vitamina C plasmática podría aumentar las oportunidades para el análisis rutinario de vitamina C en plasma en medicina clínica.

MÉTODOS

La vitamina C del plasma se puede analizar mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detección electroquímica (CE) o ultravioleta (UV). Modificamos los métodos existentes de HPLC-UV para el análisis total de vitamina C en plasma (la suma del ácido ascórbico y dehidroascórbico) para desarrollar un procedimiento de reducción de muestra simple, a pH bajo constante seguido de una separación isocrática de fase inversa de HPLC usando una fase móvil acuosa no tamponada a pH bajo. Aunque la HPLC-EC es ampliamente recomendada sobre la HPLC UV para el análisis total de la vitamina C en plasma, los dos métodos nunca han sido comparados directamente. Comparamos formalmente el método UV-HPLC simplificado con EC-HPLC en 80 muestras clínicas consecutivas.

RESULTADOS

El método UV-HPLC simplificado fue menos costoso, más fácil de configurar, requirió menos reactivos y ningún ajuste de pH, y demostró una mayor estabilidad de muestra que muchos métodos existentes para el análisis de vitamina C en plasma. Cuando se comparó con el método gold-standard EC-HPLC en 80 muestras clínicas consecutivas que mostraban una amplia gama de concentraciones plasmáticas de vitamina C, se desempeñaron la forma equivalente.

CONCLUSIÓN

La facilidad de configuración, sencillez y sensibilidad del método de análisis de la vitamina C plasmática descrito aquí podría hacerlo práctico en un laboratorio hospitalario normalmente equipado. A diferencia de cualquier método previo de HPLC-UV para el análisis total de la vitamina C en plasma, se comparó rigurosamente con el método de EC-HPLC estándar de oro y se desempeño en forma equivalente. La adopción de este método podría aumentar la disponibilidad de un análisis de vitamina C en plasma en la medicina clínica.

BIBLIOGRAFÍA

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Metabolismo de la vitamina C. El ácido ascórbico participa tanto en las reacciones ácido-base (ácido ascórbico-ascorbato, pK 4,2) como en reacciones de oxidorreducción (ácido ascorbato-dehidroascórbico). La última reacción implica la creación transitoria del radical ascorbilo (no mostrado). La vitamina C (o vitamina C total) se refiere a la suma de ácido ascórbico, ascorbato y ácido deshidroascórbico. Bajo las condiciones de pH neutro y fuertemente reductor en el torrente sanguíneo, casi toda la vitamina C circula como ascorbato. Tan pronto como se las células sanguíneas se remueven del plasma, el ascorbato se oxida progresivamente hasta el ácido deshidroascórbico, que es altamente propenso a la hidrólisis irreversible del ácido 2,3-dicetogulónico. El ácido dicetogulónico se oxida a moléculas más pequeñas, incluyendo el oxalato, que se excretan en la orina. Para minimizar la pérdida de vitamina C, el plasma recién obtenido debe ser inmediatamente desproteinizado con ácido y congelado instantáneamente, y en condiciones fuertemente ácidas se mantendrán tanto como sea posible a lo largo del almacenamiento y procesamiento de la muestra

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